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臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士備考資料：抗血清的鑒定
動物血采集后，立即分離出血清，此抗血清在保存或應(yīng)用前，必須作效價(jià)和特異性鑒定。
(一)雙向免疫擴(kuò)散法鑒定抗體的特異性
按雙向免疫擴(kuò)散技術(shù)打兩排孔，上排放抗原粗提物(如抗原來自動物血清則放相應(yīng)的混合血清)和純化抗原，下排加抗血清，進(jìn)行雙擴(kuò)散18～24h后，仔細(xì)觀察上下兩排孔之間出現(xiàn)的沉淀線。若與粗抗原及純抗原之間皆出現(xiàn)一條沉淀線，且兩者互相融合，則證明該動物已產(chǎn)生單價(jià)特異性抗體;不出現(xiàn)沉淀線，表明示免疫成功。若與純化抗原出現(xiàn)一條，而與粗抗原出現(xiàn)多條線，且其中一條沉淀線與純抗原沉淀線相連接，也是成功的免疫，待取血后將雜抗體吸收去除，可以成為單價(jià)特異性抗體。
(二)雙向免疫擴(kuò)散法則定抗血清效價(jià)
測定抗血清效價(jià)有兩種稀釋方法：一是稀釋抗血清，如1/2、1/4、1/8、1/16對倍稀釋，分別與一個(gè)濃度的純抗原反應(yīng);另一是稀釋抗原，即把抗原作對倍稀釋或按濃度(如mg/ml)進(jìn)行稀釋，分別與不同濃度的抗血清進(jìn)行雙擴(kuò)散試驗(yàn)(稱為棋盤滴定)，見表10-1。
表10-1抗血清效價(jià)測定
表中+～+++代表出現(xiàn)沉淀線的濃度，如1:8抗體出現(xiàn)中等濃度沉淀線，與1:16、1:32則出現(xiàn)較弱的沉淀線。按表10-1的互為比例稀釋后確定抗血清的效價(jià)為1:32，最佳抗原濃度為1:16。效價(jià)在1:8以上即可采用于一般試驗(yàn)。
(三)其他鑒定方法
有時(shí)，因抗原特殊，沉淀線不易出現(xiàn)，特別是制備的抗血清將用于某種試驗(yàn)時(shí)，則考慮用其它方法(如血凝試驗(yàn)、抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、放射免疫技術(shù)等)測定其效價(jià)。
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