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重組腺病毒pAd-BMP7轉(zhuǎn)染大鼠骨髓MSCs及骨向分化的研究
畢業(yè)論文
全部作者: | 戚孟春 胡靜 鄒淑娟 王大章 李繼華 |
第1作者單位: | 唐山華北煤炭醫(yī)學(xué)院口腔系 |
論文摘要: | 目的 本研究旨在觀察骨形成蛋白-7(BMP-7)重組腺病毒對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)骨向分化的影響,并檢測(cè)BMP-7在MSCs中的表達(dá)。方法 測(cè)定重組腺病毒pAd-BMP7的滴度。將MSCs分成實(shí)驗(yàn)和對(duì)照2組,分別轉(zhuǎn)染pAd-BMP7和空白載體pAdTrack-CMV,檢測(cè)外源基因轉(zhuǎn)染效率,并在骨向誘導(dǎo)下觀察細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)形成情況。應(yīng)用RT-PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)手段進(jìn)1步檢測(cè)BMP-7在MSCs中的表達(dá)。結(jié)果 重組腺病毒pAd-BMP7的滴度可達(dá)2.0×1012 pfu/ml;外源基因的轉(zhuǎn)染效率接近100%,表達(dá)時(shí)間持續(xù)5~7周,3周內(nèi)表達(dá)水平較高。轉(zhuǎn)染BMP-7的實(shí)驗(yàn)組體外礦化結(jié)節(jié)形成早于對(duì)照組,結(jié)節(jié)的數(shù)目和體積均較對(duì)照多。RT-PCR和免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)證實(shí)了BMP-7在大鼠MSCs中的有效表達(dá)。 結(jié)論 本研究結(jié)果提示BMP-7重組腺病毒可有效轉(zhuǎn)染大鼠骨髓MSCs,并促進(jìn)其骨向分化;轉(zhuǎn)染的BMP-7得到了有效表達(dá)。本研究采用的基因工程策略為顱頜面骨缺損的修復(fù)提供了1個(gè)有價(jià)值的手段。 |
關(guān)鍵詞: | 骨形成蛋白-7;腺病毒;基因克。婚g充質(zhì)干細(xì)胞,骨向分化 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文) |
發(fā)表日期: | 2005年11月22日 |
同行評(píng)議: | 作者探討應(yīng)用基因增強(qiáng)骨組織工程的可能,為其應(yīng)用到修復(fù)顱頜面首缺損提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),是1篇有較高水平的口腔基礎(chǔ)研究論文。但是在結(jié)果中OD法和GFP測(cè)定法病毒滴度相差4倍,應(yīng)作出解釋。 |
綜合評(píng)價(jià): | |
修改稿: | |
注:同行評(píng)議是由特聘的同行專家給出的評(píng)審意見,綜合評(píng)價(jià)是綜合專家對(duì)論文各要素的評(píng)議得出的數(shù)值,以1至5顆星顯示。 |
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