抗酸桿菌痰涂片檢驗的實驗室生物安全

        抗酸桿菌痰涂片檢驗作為對傳染性肺結(jié)核的診斷手段比X線診斷準確性高；作為實驗方法，技術相對簡單，容易標準化和完成操作；其投入設備少、成本低；從收到標本到報告結(jié)果的時間短，能夠及時、準確地評價涂陽患者的治療效果，被我國設為結(jié)核病控制項目的主要實驗室檢驗方法。但結(jié)核分枝桿菌（抗酸桿菌）為二類高致病性病原菌，其自身的生物學特性使其容易在實驗室造成對工作人員及相關人員的感染和環(huán)境的污染，形成對公眾的傷害，操作結(jié)核分枝桿菌的實驗室人員結(jié)核病發(fā)病率比其他人群高三倍，因此抗酸桿菌痰涂片檢驗的實驗室安全問題已經(jīng)成為當前結(jié)核病防治機構實驗室必須關注的問題
        目前，在市、縣、鄉(xiāng)級結(jié)核病防治機構沒有建立BSL-2實驗室的情況下，就更好地保障實驗室的生物安全問題，本人根據(jù)多年的工作經(jīng)驗，談一些粗淺的看法。
        實驗室的生物安全工作的開展應遵循科學合理、安全首位、軟件在先、嚴格管理、遠離病原、預防為主、使用方便、厲行節(jié)約的原則，具體實施如下：
實驗室首先要配備必須的安全設施：
        1）有獨立的實驗室，室內(nèi)有上下水，通風良好；
        2）室內(nèi)設通風柜、高壓滅菌器、紫外線燈、廢物桶、感應水龍頭；
        3）標本的收集、涂片、染色、鏡檢、登記和涂片的儲存應在各自獨立的區(qū)域；
        4）設有獨立生物咳痰室，內(nèi)設紫外線燈（按1.5W每立方米計算），每個病人咳痰后必須打開紫外線燈滅菌，如果沒有此設施，要叮囑病人在遠離人群的開放空間留取標本，防止肺結(jié)核病人咳漱產(chǎn)生的結(jié)核桿菌氣溶膠造成對人的傳播及對環(huán)境的污染。
        其次要做好個人防護，實驗室工作人員要配備一次性聚氯乙烯手套、一次性帽子、口罩、鞋套和防護服。
        第三要使用以下消毒劑：5%的苯酚溶液、75%的酒精、甲醛、2%的戊二醛及2%的乙醛溶液。
        在操作環(huán)節(jié)上，嚴格遵守以下方法和措施：
        實驗前首先要用紫外線燈將操作臺面及室內(nèi)照射一小時，工作人員進入實驗室前必須穿好防護服、戴上口罩、手套、鞋套，病檢查有無破損；女檢驗員長發(fā)束在帽內(nèi)；操作人員在操作時應嚴格遵守實驗室安全操作規(guī)程和標準化操作程序（SOP)；在實驗過程中，禁止一切與實驗無關的活動，保證集中精力完成操作；在操作過程中，要警惕分枝桿菌氣溶膠的產(chǎn)生，涂片操作要小心謹慎，動作輕緩，固定和染色操作時產(chǎn)生氣溶膠的幾率較大，Allen  Bw實驗結(jié)果表明，樣品熱固定不能殺滅所有涂片標本中的結(jié)核桿菌，若涂片長時間暴露在高溫中，殘留活菌減少，并僅見于涂片厚的部分，從而提高熱固定時痰液對細菌的保護作用，新鮮痰液粘滯度越大，加熱固定時對細菌的保護作用越強，為避免此風險，操作人員要做到雙手伸入操作臺操作，面部通過通風柜的玻璃與操作臺面隔開（在操作過程只利用通風柜的屏障功能）；完成涂片后立即染色，若不能及時染色涂片，應浸泡在2%乙醛溶液中，不可以將涂片暴露在空氣中，涂片在空氣中暴露的時間越長，感染的機會越大，這是操作者尤其需要注意的問題；另外涂片不能涂抹太厚尤其是新鮮痰液；經(jīng)過染色的結(jié)核分枝桿菌已不能存活。       實驗結(jié)束后，所有物品歸放原位，標本盒及其他廢棄物放入5%的苯酚溶液廢物桶中，涂片用鑷子夾取放入儲存柜內(nèi)，用5%的苯酚溶液擦拭玻片夾、放置標本的搪瓷盒、臺面，鑷子放在75%的酒精中浸泡，關上通風柜的玻璃窗，打開通風柜紫外線燈；操作人員在實驗室近門處依次脫掉帽子、防護服、鞋套、手套裝入高壓滅菌袋，用肥皂洗手，流水沖洗；出門后打開室內(nèi)紫外線燈，關好門；兩小時后關閉紫外線燈、例行安全檢查后關閉門窗離開；一次性手套、帽子、鞋套、過期的涂片和經(jīng)過24小時浸泡的廢棄物經(jīng)高壓滅菌后按醫(yī)療垃圾處理；高壓滅菌時采用生物或化學指示劑以確保滅菌效果；防護服在每次實驗完畢后均需高壓滅菌。
        為確保實驗室生物安全，還要建立建全規(guī)章制度并嚴格遵守。規(guī)章制度主要強調(diào)以下幾個方面：
        1）操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴格的生物安全培訓。
        2）實驗室管理方面，應嚴格限制非實驗室人員進入實驗室，減少實驗室內(nèi)外感染的機會，實驗室必須保持肅靜，操作人員進入實驗室盡量避免攜帶非必須物品，實驗臺上不放置任何與實驗無關的物品，禁止吸煙、飲食及用嘴濕潤筆或標簽等，不要用手撫摸頭面部。
        3）制定實驗室和咳痰室定期消毒制度。
        4)制定操作員定期肺部檢查制度。
        除建立健全規(guī)章制度外，還要制定實驗室應急預案，包括防水、防火、意外暴露的處理及污染消毒等。
        總之，實驗室生物安全不僅涉及操作人員自身安全，還涉及他人健康，所以這個問題必須引起我們高度重視，以便更好地保障結(jié)核病控制項目的實施成果。

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