探討痛風靈膠囊鎮(zhèn)痛作用及機制

摘要： 目的 觀察痛風靈膠囊的鎮(zhèn)痛效果，并探討其作用機制。 方法 采用熱刺激引起小鼠疼痛反應法、冰醋酸刺激引起小鼠扭體反應法，以及甲醛法引起小鼠足疼痛反應,觀察其鎮(zhèn)痛作用，并采用甲醛疼痛模型觀察其對炎癥局部組織中前列腺素(PGE2)的影響。 結果 痛風靈膠囊可以明顯抑制醋酸導致的小鼠扭體反應, 但對熱刺激所致小鼠疼痛無明顯鎮(zhèn)痛作用，對甲醛所致小鼠第二相反應有明顯抑制，降低炎癥組織中的PGE2含量。結論 痛風靈膠囊對外周性疼痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其機制與抑制炎癥組織中PGE2生成有關。

關鍵詞： 痛風靈膠囊；鎮(zhèn)痛；前列腺素E2

　　Abstract:Objective To investigate the analgesic effects and mechanism of Tongfengling(TFL) capsules. Methods Analgesic effects of TFL were observed with pain model mice induced with hot plate, writhing response induced with acetic acid and mouse formalin test. The content of PGE 2 was measured in mouse formalin test. Results TFL capsules could not elevate the pain threshold, but could inhibit writhing response and second phase of formalin test in mice, decreased the concentration of PGE2 in mouse formalin test. Conclusion TFL capsules has obvious analgesic effects, which was related to its inhibitory effects on peripheral inflammatory mediators PGE2.
　　Key words:Tongfengling capsules ; analgesic effect; prostaglandin(PGE2)
　　近年來，隨著人民生活水平的提高，飲食結構的改變，痛風的發(fā)病率呈現出不斷上升的趨勢，給人們的生活與工作帶來極大的不便。痛風靈膠囊主要由秦艽、防己、延胡索等組成，經臨床證實有明顯的鎮(zhèn)痛療效。為此筆者對痛風靈膠囊的鎮(zhèn)痛效果進行實驗研究，并探討其鎮(zhèn)痛的作用機制。
　　1 實驗材料
　　1.1 實驗動物NIH小鼠，由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供（合格證號：2006A017）,符合SPF級標準。
　　1.2 藥物及試劑痛風靈膠囊：本院中藥藥理教研室提供，批號：20050702。冰醋酸：廣東光華化學廠有限公司，批號：20041214。甲醛：汕頭市光華化學廠，批號：20040316。羅通定片（30 mg/片）：廣州康和藥業(yè)有限公司，批號：041001。吲哚美辛腸溶片（25 mg/片）：廣東華南藥業(yè)有限公司，批號：050801。
　　1.3 主要儀器YLS-6A型智能熱板儀（山東省醫(yī)學科學院設備站）；UV-1800紫外-可見分光光度計（北京瑞利分析有限公司）。
　　2 方法
　　2.1 對熱刺激引起的小鼠疼痛反應的影響［1］　　取雌性NIH小鼠，體質量18～22 g，依次放入熱板內，仔細觀察并記錄自放入熱板至出現舔后足所需時間作為該鼠的痛閾值。凡舔后足時間小于5 s或大于30 s者則棄之，共測2次，取平均值作為給藥前痛閾值。將篩選合格的小鼠48只隨機分為4組，分別以生理鹽水、羅通定、痛風靈膠囊高劑量、低劑量灌胃，給藥容積為20 mL/kg，1次／d，連續(xù)給藥5 d，末次給藥后1 h、2 h測量痛閾值，比較各組的差異。
　　2.2 對冰醋酸引起的小鼠扭體反應的影響［2］　　取NIH小鼠64只，雌雄各半，體質量18~22 g，隨機分為4組，分別以生理鹽水、吲哚美辛、痛風靈膠囊高劑量、 低劑量灌胃，給藥容積為20 mL/kg，1次／d，連續(xù)給藥5 d，于末次給藥后1 h,分別由腹腔注射0.6％醋酸（0.2 mL/只）。觀察15 min內出現扭體反應的次數，比較各組差異。
　　2.3 對甲醛法小鼠疼痛強度的影響［1］　　取NIH小鼠48只，雌雄各半，體質量18~22 g，隨機分成4組，即生理鹽水組、吲哚美辛陽性對照組、痛風靈膠囊高、低劑量組。各實驗組小鼠每日灌胃給藥1次，給藥容積為20 mL/kg，對照組給予等量的生理鹽水，連續(xù)5 d，末次給藥后1 h，各小鼠右后足跖皮下注射2.5％甲醛生理鹽水溶液50 μL/只，立即觀察1 min，10 min,20 min,30 min,40 min時的疼痛反應，每時間段觀察45 s，記錄該45 s內出現的最高痛級，并按分級標準評定受試動物的疼痛強度，比較組間差異。評分方法：舔、咬或抖足3分，提足2分，跛行1分，走動自如0分。
　　2.4 對甲醛致小鼠足腫脹組織中PGE2含量的影響［2］　　取NIH小鼠48只，雌雄各半，體質量18~22 g，隨機分成4組，即生理鹽水組、吲哚美辛陽性對照組、痛風靈膠囊高、低劑量組，各實驗組小鼠每日灌胃給藥一次，給藥容積為20 mL/kg，對照組給予等量的生理鹽水，連續(xù)5 d，末次給藥后1 h，各小鼠右后足跖皮下注射2.5％甲醛生理鹽水溶液50 μL /只，24 h后處死小鼠，距右踝關節(jié)上1 cm處剪下右足， 稱重， 剝皮后浸泡于5 mL生理鹽水中1 h， 以1 500 r/min離心10 min，吸取上清液0.5 mL，加入0?5 mol/L氫氧化鈉－甲醇溶液2 mL，在50 ℃水浴箱中水浴異構化20 min，加甲醇稀釋至20 mL，于紫外分光光度計278 nm處測定吸收值，并按下述公式計算PGE2含量：PGE2含量（μg/g）＝（E278×13.13×Vt×D）/W。比較各組間差異［注：Vt＝PGE2浸泡液總體積，D＝稀釋倍數，W＝右下肢重量（g）, E278＝278 nm處的吸收值）］。
　　2.4 統計學處理采用SPSS 11.5統計軟件包進行方差齊性檢驗、方差分析（ANOVA），以P

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