Dipasic對結(jié)核菌耐藥性的研究

Dipasic對結(jié)核菌耐藥性的研究 【論文摘要】：目的：了解Dipasic對耐藥菌株是否有效及其藥物抑菌濃度。方法：藥敏培養(yǎng)基內(nèi)加入10種不同濃度抗結(jié)核藥物，加入結(jié)核菌菌液10-3毫克。結(jié)果：四周后觀察三種抗結(jié)核藥物耐藥情況。結(jié)論：DPC是一種獨(dú)立的抗結(jié)核藥物對耐藥結(jié)核菌都有效，但在1μg濃度時(shí)仍有30%生長，認(rèn)為用藥量量應(yīng)加倍。

【關(guān)鍵詞】：Dipasic　　 耐藥性

【論文】：抗結(jié)核藥物的使用，在結(jié)核病防治上起了劃時(shí)代的作用。50年代采用INH PAS聯(lián)合治療，取得了較好療效。但PAS服用量大，消化道反應(yīng)多，病人不能耐受，90%不能完成治療程。瑞士Geistlich藥廠研制的Dipasic（簡稱DPC）（德國又名GEWO399），是以特殊方法，將INH與PAS合成的化合物。它能代替INH PAS聯(lián)合用藥，增加療效，副作用明顯比PAS為少，德國Freudenthal等50余位專家均有Dipasic臨床應(yīng)用的報(bào)告，認(rèn)為有效。但無Dipasic耐藥性的報(bào)道。當(dāng)前，我國耐藥性病人不斷增加，尋求合理用藥，是當(dāng)務(wù)之急，為此我們對Dipasic作耐性研究，目的在于，（1）了解Dipasic對耐藥菌株是否有效？（2）Dipasic的藥物抑菌濃度如何？以便研究用量與用法，提高臨床療效。1、研究方法：從安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院的門診及病房肺結(jié)核病人的痰進(jìn)行結(jié)核菌培養(yǎng)，無論病人是初治抑復(fù)治，亦不分男女老少，凡痰菌培養(yǎng)陽性者，即作為研究對象。結(jié)核菌的檢驗(yàn)，按標(biāo)準(zhǔn)常規(guī)操作進(jìn)行。藥敏培養(yǎng)基的制備：液體雞蛋培養(yǎng)基內(nèi)，按比例加入抗結(jié)核藥物，其濃度按我國藥敏標(biāo)準(zhǔn)，如INH、PAS、TB1，每毫升分別為1μg及10μg，SM、KM、CPM分別為10μg，RFP及RFD分別為50μg及250μg，EMB為5μg及50μg。Dipasic則暫定為每毫升含藥0.1μg、0.5μg、1.0μg及10μg四種。加入藥物后，充分搖勻混合后，分裝在中試管內(nèi)，每管5毫升，擺成斜面，進(jìn)行85℃—90℃一小時(shí)凝固滅菌，24小時(shí)后再滅菌一次，制成的含藥培養(yǎng)基，保存在冰箱，一個(gè)月內(nèi)有效。菌液制備：取培養(yǎng)基上生長一個(gè)月內(nèi)的菌落，于磨菌器內(nèi)滅菌生理鹽水研磨呈均勻的菌液，再加滅菌鹽水稀釋，與標(biāo)準(zhǔn)管比較（制成每毫升含1毫升的菌液），最后100倍稀釋成每毫升含10-2毫克菌液備用。菌液接種：將含不同濃度的含藥培養(yǎng)基順序排列，并有不含藥物的培養(yǎng)基作為對照。取每毫升含10-2毫克的菌液，每管接種0.1毫升，接種菌量為10-3毫克的菌液。放在37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)，每周觀察一次，四周報(bào)告結(jié)果。報(bào)告的標(biāo)準(zhǔn)是，如培養(yǎng)基上無菌生長者為（一），培養(yǎng)基上有菌落數(shù)在50個(gè)以下者為（ ），培養(yǎng)基上菌落數(shù)50個(gè)以上，但無融合者為（ ），培養(yǎng)基上菌落大部分融合者為（ ）。2、研究結(jié)果：我們研究的10種抗結(jié)核藥物耐藥性試驗(yàn)，這10種抗結(jié)核藥物是：INH、PAS、DPC、TB1、EMB、RFP、RFD、SM、KM及CPM，圍繞本文目的，我們僅取30例病人的其中INH、PAS及DPC三種藥物的耐藥性進(jìn)行分析，其他另行報(bào)道。INH、PAS的濃度，按國家耐藥性標(biāo)準(zhǔn)，分為1μg及10μg，以每毫升1μg為耐藥上界，1μg藥濃下不能生長者為陰性，為敏感菌。1μg生長者為陽性，為耐藥菌。DPC的濃度，由于我們尚需尋求合適的抑菌濃度，故分為每毫升含藥0.1μg、0.5μg、1.0μg及10μg四種不同的濃度。為便于統(tǒng)計(jì)比較，暫以1μg作為耐藥標(biāo)準(zhǔn)，1μg以下者為敏感，1μg以上者為耐藥。

　　　　　　　　　　 表1 30例耐藥情況分析



培養(yǎng)結(jié)果　　 INH（%）　　　　 PAS（%）　　　　 DPC（%）

　　敏感　　　　 3（10.0）　　　　 22(73.3)　　　　 20(66.6)

　　耐藥　　　　 27(90.0)　　　　 8(26.7)　　　　 10(33.4)

從表1可見耐INH菌珠已達(dá)90%,耐DPC菌株為33.4%,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,X2=27.44,P＜0.001,有高度顯著性。PAS與DPC比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，校正卡方為0.062，P＞0.05,無顯著性。

　　　　　　　　　　　　　　表2 敏感與耐藥程度的分析

培養(yǎng)結(jié)果　　　　 INH　　　　　　 PAS　　　　　　　　DPC

（一）　　　　　　3(10.0%)　　　　22(73.4%)　　　　 20(66.6%)

（＋）　　　　　　1(3.3%)　　　　 2(6.6%)　　　　　　3(10.0%)

(＋＋)　　　　　　4(13.3%)　　　　3(10.0%)　　　　 6(20.0%)

(＋＋＋)　　　　 22(73.4%)　　 3(10.0%)　　　　 1(3.3%)

表1和表2可以說明INH、PAS、DPC為三種不同的抗結(jié)核藥物，他們對不同的結(jié)核菌，有不同的敏感與耐藥情況。從8例耐PAS菌株中，我們發(fā)現(xiàn)，此8例同時(shí)有三種以抗結(jié)核藥物之耐藥，耐DPC菌株10例中，也有此一現(xiàn)象，是多種耐藥性菌株。

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