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臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的采集和處理
臨床檢驗的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實驗診斷依據(jù)。為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性，在檢驗醫(yī)學(xué)中必須堅持全面質(zhì)量控制(totalqualitycontrol,TQC。即指對影響臨床檢驗結(jié)果可靠性的各方面因素及各個環(huán)節(jié)進行質(zhì)量控制)和全過程質(zhì)量控制(即指對實驗工作的全過程進行質(zhì)量控制和質(zhì)量管理)。下面是yjbys小編為大家?guī)淼呐R床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的采集和處理的知識，歡迎閱讀。
臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的采集和處理
一、臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本的定義
臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本是指為完成某項或多項臨床化學(xué)檢驗項目而采集的一定量的血液，包括抗凝及非抗凝血。
二、血液標(biāo)本的采取
(一)采取部位
1.靜脈采血：應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈，小兒和新生兒有時用頸靜脈和前囟靜脈。
2.動脈采血：主要用于血氣分析時。常用的動脈為股動脈、肱動脈、橈動脈和臍動脈。
3.毛細(xì)血管采血：適用于僅需微量血液的試驗或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端，小兒有時為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應(yīng)為2mm(<2.5mm),采血局部應(yīng)無炎癥、水腫等。
(二)標(biāo)本類型
臨床化學(xué)檢驗血液標(biāo)本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用，除前者不含纖維蛋白原外，其余多數(shù)化學(xué)成分無差異;全血只有在紅細(xì)胞內(nèi)成分與血漿成分相似時才用;血氣分析、血紅蛋白電泳等時用全血，一般臨床化學(xué)分析多不用全血。
三、全血處理為血清或血漿
血液標(biāo)本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清(漿)從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來。一般應(yīng)于采血后2h內(nèi)分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心后三個階段，對各不同階段均有具體要求。
(一)離心前階段
即指標(biāo)本采集到離心處理前的一段時間。
1.血清：標(biāo)本離心前一般應(yīng)令其自行凝集，不可用木棍等剝離凝血塊。通常于室溫(22~25oC)放置30~60min血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集;冷藏標(biāo)本凝集緩慢;加促凝劑時凝集加快(標(biāo)本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合5~10次，以確保促凝劑作用)。
2.血漿：需用血漿標(biāo)本時，必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，而且采血后必須立即輕輕顛倒采血管混合5~10次(以確�？鼓齽┌l(fā)揮作用)，5~10min后即可分離出血漿。
3.冷藏標(biāo)本：標(biāo)本冷藏可抑制細(xì)胞代謝，穩(wěn)定某些溫度依賴性成分?但全血標(biāo)本一般不能冷藏;血鉀測定標(biāo)本冷藏不得超過2h。血液中兒茶酚胺、pH/血氣、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲狀腺激素等檢測時需用制冷的標(biāo)本。
標(biāo)本需要冷藏(2~8oC)時，標(biāo)本采取后應(yīng)立即將標(biāo)本置于冰屑或冰水混合物(不可用大冰塊)，并且必須保證標(biāo)本與制冷物充分接觸，保證制冷物達(dá)到標(biāo)本的高度。
4.代謝抑制劑和防腐劑：某些添加劑加入血液標(biāo)本中能抑制細(xì)胞代謝，可以防止血液標(biāo)本貯存時分析物濃度的變化。血液葡萄糖測定時，如在血液中加入氟化鈉，在血細(xì)胞未分離的情況下，葡萄糖在22~25oC時可穩(wěn)定24h，2~8oC時可以穩(wěn)定48h;但在新生兒和兒童標(biāo)本，由于紅細(xì)胞壓積高，用氟化鈉難以控制細(xì)胞的糖酵解作用;甲醛-草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測定;氟化鈉-麝香草酚混合劑因能抑制酶活性，不適用于酶學(xué)測定。
5.標(biāo)本采集現(xiàn)場：(1)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送往實驗室，尤其當(dāng)收集區(qū)溫度超過22oC時此點更為重要;(2)血液標(biāo)本采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置，以減少管中內(nèi)容物振動，促進凝血完全，防止標(biāo)本蒸發(fā)、污染和外濺等;(3)已收集的血液標(biāo)本應(yīng)溫和地處理，要防止標(biāo)本管振蕩所造成的溶血;溶血可影響測定結(jié)果。有嚴(yán)重影響(使結(jié)果升高)的項目有：乳酸脫氫酶、血清門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀和血紅蛋白;引起值得注意的影響的項目有：血清鐵(↑)、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(↑)和血清甲狀腺素(↓);輕度受影響(增加)的有：總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶;(4)應(yīng)避免對光線敏感的分析物暴露在人造光或太陽光(紫外線)照射下。如VA、VB6、β-胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測定時，標(biāo)本管應(yīng)該用鋁箔或類似物質(zhì)包裹保護起來。
6.標(biāo)本運送：全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場運送至實驗室，如果運送距離較遠(yuǎn)，特別是因分析物穩(wěn)定性有影響，必要時可于采血現(xiàn)場分離出血清或血漿后，再送往實驗室;標(biāo)本運送過程中要注意標(biāo)本的包裝、溫度要求、處理方法等，要確保分析成分的穩(wěn)定性;標(biāo)本管在運送過程中要保持管口封閉、向上垂直放置。
7.實驗室接受標(biāo)本及離心標(biāo)本準(zhǔn)備：(1)要有標(biāo)本收取記錄(應(yīng)認(rèn)真核對檢驗中清單，對有關(guān)情況要認(rèn)真記錄，標(biāo)本接收及處理應(yīng)簽字登記);(2)對接受的標(biāo)本要予以分類準(zhǔn)備離心;(3)實驗室接受標(biāo)本后應(yīng)仍保持標(biāo)本管于密閉封口、管口向上，垂直位放置。管塞移去后血中CO2丟失，會造成pH增加，離子鈣和酸性磷酸酶減少，尤其pH變化會影響某些檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性;(4)標(biāo)本凝集時間要充分;加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心;加促凝劑的標(biāo)本可于采血后5~15min盡早離心;抗凝的全血標(biāo)本(鋅、鋰、原卟啉等測定時)可以不離心;(5)冷藏(2~8oC)標(biāo)本應(yīng)保持這個溫度直到準(zhǔn)備離心。推薦用溫度控制離心機;(6)離心標(biāo)本前不主張用小木棒或類似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊，人為剝離會誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時，一定要十分注意，動作一定要輕柔。
(二)離心階段
即指標(biāo)本處于離心機里的一段時間。
1.離心時間和相對離心力(RCF)：臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時，RCF(1000~1200)×g，離心時間為5~10min。
2.溫度控制離心：離心時產(chǎn)熱不利于分析物穩(wěn)定，臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時必須采用溫度控制離心機。一些溫度依賴性分析物(如促腎上腺皮質(zhì)激素、環(huán)腺苷酸、兒茶酚胺等)應(yīng)在4oC分離;無特殊溫度要求的分析物，離心溫度應(yīng)設(shè)定在20oC~22oC;溫度低于15oC可以人為地使血鉀測定值增高;冷藏運送的標(biāo)本必須在要求的溫度下離心。
3.關(guān)于再離心：標(biāo)本離心最好一次完成，若需再次離心，應(yīng)距上次離心相隔時間很短;對于含有分離物質(zhì)的血標(biāo)本絕不可以再離心。
(三)離心后階段
指標(biāo)本離心后和用于檢測的血清或血漿被取出一定量之前的一段時間。
1.血清或血漿與接觸的血細(xì)胞和凝塊的分離應(yīng)在采血后盡快(2h內(nèi))完成。
2.分離的血清或血漿的貯存：實驗室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時間，是分析物穩(wěn)定性和測定結(jié)果準(zhǔn)確性的重要參數(shù)。(1)于22oC~25oC血清或血漿的保存不超過8h;(2)實驗于8h內(nèi)不能完成時，血清或血漿應(yīng)置2oC~8oC保存;(3)48h內(nèi)不能完成的實驗項目，或分離的血清或血漿需貯存48h以上時，應(yīng)于-20oC保存;(4)標(biāo)本不可反復(fù)凍融(只能凍融一次)，且不可貯存于無霜冰箱(可造成樣品溫度變化);(5)離心后分離凝膠(凝膠屏障)上面的血清可保存2~5天，但必須保證凝膠的完整性;但應(yīng)用非凝膠分離物質(zhì)時，離心后必須立即將血清或血漿移出。(6)血清或血漿必須保存于密閉的試管中。
四、血清或血漿分離物質(zhì)
是指將血清或血漿從全血中分離出來的物質(zhì)，包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)。
(一)凝膠物質(zhì)
為一類具有特定粘度和特殊比重(介于血清或血漿與凝塊之間的比重)的惰性凝膠物質(zhì)，用(1000~1100)×gRCF離心10min，能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障，從而將血清或血漿與其接觸的血細(xì)胞、凝塊分開。
(二)非凝膠物質(zhì)
是由惰性物質(zhì)(玻璃、塑料、纖維、毛氈等)構(gòu)成的小珠、盤、濾器、纖維塞等組成。具有介于血清或血漿與凝塊之間的比重，將其輕輕加入血管中，用(1000~1100)×gRCF離心10min時，可透過血液移動至血清或血漿與血細(xì)胞、凝塊之間，形成一個界面，使血清或血漿被分離出來。
(三)完整的凝膠管系統(tǒng)
該系統(tǒng)是由一個真空采血管(硅化塑料管)、內(nèi)含惰性凝膠物質(zhì)、促凝劑或抗凝劑組成。使用時要注意該產(chǎn)品必須具有相應(yīng)性能證書和有效期，并且必須在其有效期內(nèi)正確使用。
隨著檢驗方法日益完善，高精檔次的自動化儀器的大量應(yīng)用，以及檢驗的科學(xué)管理和檢驗工作人員技術(shù)水平不斷提高，明顯降低檢測過程中的影響因素和干擾，而分析檢測前的各類影響或干擾因素相對增多�，F(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)對檢測標(biāo)本的留取與收集提出較高的要求，而廣大就診患者也必需了解留取標(biāo)本的基本知識，遵照囑托，配合檢驗人員，以使檢驗結(jié)果更準(zhǔn)確準(zhǔn)確可靠。
門診檢驗常見的標(biāo)本一般包括血液(指血，靜脈血)、尿、糞便、腦脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、陰道分泌物等，這些標(biāo)本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
標(biāo)本采集注意事項
一、血液標(biāo)本
盡量避免生理因素的影響，有些生理因素，如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。采集血液標(biāo)本的條件應(yīng)盡量一致為宜，如無法避免，應(yīng)說明在標(biāo)本上注明該因素。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血，該部位應(yīng)無凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對燒傷病人，可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細(xì)胞計數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大，比較時宜便條件盡量一致。出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù)，出血時間或凝血時間等)的檢測，不宜服用抗凝、促凝藥物，以免影響測定結(jié)果。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外，目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中，有些(如血糖，血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大，一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜，有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等)，0～4℃貯存活性減弱也不一，這些項目的檢測必須及時而快速，有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要，尤其涉及血鉀，LDH等的測定。切忌在輸液的同側(cè)靜脈抽血做各項檢驗。
二、尿液標(biāo)本
同血標(biāo)本一樣，尿液標(biāo)本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大，特別是飲食的影響，故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿標(biāo)本，較濃縮和酸化，有形成分(如血細(xì)胞，上皮細(xì)胞，管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿，留取方便，但受飲食、運動、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖，尿蛋白和尿膽原的檢查，此時的尿標(biāo)本可增加試驗敏感性，檢出較輕微的病變。12小時尿細(xì)胞計數(shù)，即Addis(前晚8時排空膀胱后留取至次日8時的所有尿液)，因時間較長，細(xì)菌易繁殖，須加入防腐劑甲醛。
24小時尿(第一天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量，包括蛋白，糖，Ca2十等，檢測不同的物質(zhì)，選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng)，要求無菌，沖洗外明后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量，最少12m1，最好50ml，定時尿須全部收集，對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。
三、糞便標(biāo)本
糞便標(biāo)本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的件簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便，對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查，從有膿血和稀軟處取材，保溫送檢。
查日本血吸蟲蟲卵時應(yīng)取粘液、膿血部分，孵化毛蚴時至少留取30g糞便，且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺處處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學(xué)法)，試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑，維生素C等整理搜集。所有糞便標(biāo)本采集后1小時內(nèi)應(yīng)檢查完畢，以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。
四、腦脊液標(biāo)本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢，放置過久將影響檢驗結(jié)果：如細(xì)胞變性，破壞，導(dǎo)致計數(shù)和分類不被：有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少：細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管，第一管作細(xì)菌培養(yǎng)，第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查，第三管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難，全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。
五、胸腹水標(biāo)本
與腦脊液標(biāo)本一樣，采集后的標(biāo)本注意安全，及時送檢。一般也分裝三管，一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查，一管生化檢查，一管細(xì)菌培養(yǎng)，順序以與腦脊液相同為宜。
六、前列腺液標(biāo)本
前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集，液量少時直接滴在載玻片上及時送檢，須注意防止標(biāo)本蒸干，量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩后的尿液沉渣。
七、陰道分秘物標(biāo)本
陰道標(biāo)本采集前24小時應(yīng)禁止房事、盆浴、明道檢查、明道灌洗及局部上藥等.取材所用器械需要清潔。一般用鹽水浸濕棉拭子自陰道或陰道彎后部、宮頸管口取材，制生理鹽水涂片后觀察分泌物標(biāo)本，經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。
拓展：
臨床醫(yī)學(xué)檢驗血液標(biāo)本質(zhì)量提升策略
1資料與方法
1.1一般資料
收集2012年1月至2015年6月我院的260例不合格血液樣本,均是護理人員負(fù)責(zé)采集與送檢,不合格原因以標(biāo)識模糊、溶血、標(biāo)本量過多或者是過少、送檢不及時、標(biāo)錯標(biāo)本管等為主。260例不合格血液標(biāo)本中,25例信息丟失,20例標(biāo)本量過少,25例漏抽,24例血液標(biāo)本不符,21例送檢不及時,32例標(biāo)識模糊,23例標(biāo)本量較多,28例血液標(biāo)本凝固,29例標(biāo)本管抽錯,13例輸液中抽血,血液稀釋,20例血液標(biāo)本出現(xiàn)溶血。
1.2方法
統(tǒng)計不合格血液樣本的原因,對于不合格血液樣本需及時通知臨床人員再次收集患者的血液樣本,并及時送檢,以提高血液樣本的檢測質(zhì)量。
2結(jié)果
在本次探究過程中,260例不合格血液樣本中,103例凝血標(biāo)本,占39.62%,43例血液標(biāo)本量不符合規(guī)定要求,占16.54%,5例血液標(biāo)本錯誤,占1.92%,52例血液標(biāo)本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,占20.00%,47例脂血,占18.08%,
3討論
在血液標(biāo)本臨床檢驗中,需嚴(yán)格按照規(guī)定要求進行操作,以為臨床醫(yī)生提供可靠的血液標(biāo)本檢驗數(shù)據(jù),方便患者的臨床診斷。檢驗人員需根據(jù)患者具體的血液檢測項目選擇最佳的檢驗方法與儀器設(shè)備[2],廢除不合理的檢驗指標(biāo),促使血液樣本檢測向著合理化、規(guī)范化方向發(fā)展。同時需不斷修訂實驗室中的診斷標(biāo)準(zhǔn),以滿足不斷發(fā)展的血液樣本檢驗技術(shù)的需求。在抽血前,須做好準(zhǔn)備工作,且醫(yī)務(wù)人員以嚴(yán)謹(jǐn)、認(rèn)真的態(tài)度面對,以防對血液標(biāo)本的檢驗結(jié)果產(chǎn)生不良影響。血液樣本采集過程中所用到的試管與注射器等用具,需嚴(yán)格按照規(guī)定要求進行消毒與保存,以保證清潔性與干燥性,注意注射器與針頭無法使用酒精進行消毒,以防對血液樣本檢驗結(jié)果產(chǎn)生呢個不良影響。
現(xiàn)階段,我國醫(yī)院多使用一次性注射器、針頭與試管,很好的避免上述問題。在血液標(biāo)本采集前,患者需空腹12h,且在采血過程中,患者選擇臥位,以降低藥物、食物等因素產(chǎn)生的不良影響,空腹抽血的脂血發(fā)生率較低。在血液樣本采集過程呢夠中,需避免采集時間過長、血液樣本量不足或者是過多、抗凝效果不良等現(xiàn)象,尤其是急診患者,血液循環(huán)功能較差,因此血液樣本采集需在患者靜臥20min后,且患者使用止血帶的時間需低于60s,在抽選后立即將止血帶松開,若血液樣本采集不順,就會大大增加溶血的發(fā)生率。
血液樣本采集后需保存在真空采血管中,醫(yī)院需保證是正規(guī)廠家提供的,真空采血管顏色的不同,表示抗凝劑使用的不同,因此醫(yī)務(wù)人員需根據(jù)患者具體的檢測項目選擇相對應(yīng)的真空采血管,嚴(yán)格遵守規(guī)章制度中規(guī)定的采血管順序進行[3]。醫(yī)務(wù)人員在穿刺時,最好時選擇患者靜脈相對明顯的區(qū)域進行,且需避開患者的皮外傷部位,例如炎癥、血腫、凍瘡等,且在血液樣本采集結(jié)束后,需動作緩慢的來回晃動真空管,以保證血液與抗凝劑混合的充分性,不能將真空管平放,以防破壞血液細(xì)胞。
本研究中,筆者隨機抽取2012年1月至2015年6月我院血液檢驗科的260例不合格血液樣本,其中主要原因是凝血標(biāo)本(39.62%),依次為血液標(biāo)本出現(xiàn)溶血現(xiàn)象、脂血與血液標(biāo)本量不符合規(guī)定要求(20.00%、18.08%、16.54%),血液標(biāo)本錯誤最少(1.92%)。與鄒龍嬌[4]等人的結(jié)果保持一致。綜上所述,血液標(biāo)本是否合格直接影響檢驗結(jié)果,從而影響臨床診治,因此需提高血液樣本的合格率,以提高臨床醫(yī)學(xué)血液標(biāo)本檢驗質(zhì)量,為患者的臨床診療提供可靠的數(shù)據(jù)資料。
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