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侵襲性真菌感染標本采集
標本的采集、接收與保存是真菌檢驗的一個重要環(huán)節(jié),合格的標本是保證檢驗結(jié)果正確性的重要條件。下面是yjbys小編為大家?guī)淼那忠u性真菌感染標本采集的知識,歡迎閱讀。
概況
標本的采集、接收與保存是真菌檢驗的一個重要環(huán)節(jié),合格的標本是保證檢驗結(jié)果正確性的重要條件。
適合于深部真菌檢驗的各類標本包括血及骨髓液、各種體液、腦脊液、痰、支氣管肺泡灌洗液、支氣管毛刷、肺穿刺物、組織活檢標本、尿、糞、膿、尿道及陰道分泌物、咽拭子等。
標本采集部位消毒
一步法:葡萄糖酸氯己啶作用30s,或70%異丙醇消毒后自然干燥。
三步法:
(1) 70%乙醇,待干30s以上
(2) 1%2%碘酊(直徑達75px以上),作用30 s或10 %碘伏60 s
(3) 70 %乙醇脫碘:對碘過敏的患者,用70%乙醇消毒60s
標本的采集與處理-血液
推薦在抗真菌藥物使用前,發(fā)熱初期或寒戰(zhàn)期取靜脈血或骨髓液。
采集血液后立即注入血培養(yǎng)瓶內(nèi)并輕輕搖勻。
至少采集2套。標本與培養(yǎng)基比例為1/101/5(必須包括需氧瓶或真菌專用瓶,成人每瓶810ml)。
標本的采集與處理-血液
2小時內(nèi)常溫送檢。若不能及時送檢,則常溫保存。
評估導(dǎo)管相關(guān)性血流感染(CRBSI):
患者已拔管-采集2套外周血培養(yǎng),同時做導(dǎo)管尖Maki法半定量培養(yǎng)(導(dǎo)管尖長度125px),如1套及以上陽性,導(dǎo)管尖培養(yǎng)陽性(≥15 CFU),且培養(yǎng)菌種相同,即為CRBSI。
患者尚未拔管-至少采集1套外周血培養(yǎng),同時采集等量的導(dǎo)管血進行培養(yǎng),如導(dǎo)管血與外周血均陽性,即為CRBSI;如導(dǎo)管血培養(yǎng)陰性,外周血培養(yǎng)陽性且為念珠菌屬,且沒有其它明確感染源,也可能為CRBSI。
標本的采集與處理-骨髓
標本采集:使用肝素化的注射器或溶解離心管采集骨髓液0.5ml(兒童)至3ml(成人)后送檢。
標本處理:15分鐘內(nèi)常溫送檢。若不能及時送檢,則常溫保存。不建議常規(guī)做骨髓液培養(yǎng),如需培養(yǎng)可將骨髓液接種于培養(yǎng)瓶,但易出現(xiàn)假陽性。骨髓液 需同時做吉姆薩染色鏡檢。
標本的采集與處理-靜脈導(dǎo)管
標本采集:剪取導(dǎo)管尖段125px置于無菌容器中送檢。
標本處理:15分鐘內(nèi)常溫送檢。若不能及時送檢,則4℃保存。將導(dǎo)管置于血平板上,使用無菌鑷子將其從平板一端滾動至另一端,滾動4次,做導(dǎo)管尖Maki法半定量培養(yǎng)。不要使用含放線菌酮的培養(yǎng)基。
標本的采集與處理-腦脊液,心包液,腹水和關(guān)節(jié)液
標本采集:除腦脊液外,將其余的無菌體液置于含肝素的無菌真空采血管。腦脊液使用脊髓穿刺針采集于無菌試管中送檢。
標本處理:
15分鐘內(nèi)常溫送檢。若不能及時送檢,則常溫保存(不能冷藏)。標本大于2ml,則2000g離心10分鐘,取沉渣接種。
若標本量少于2ml,則將標本直接接種于培養(yǎng)基。
推薦使用細胞離心機對無菌體液進行涂片鏡檢。腦脊液也可直接接種于血培養(yǎng)瓶。
標本的采集與處理-膿液、引流液、創(chuàng)面分泌物及竇道
標本采集:
開放性創(chuàng)口:用無菌生理鹽水沖洗創(chuàng)面后,應(yīng)采集病灶活動性邊緣組織標本。
封閉性膿腫:局部皮膚消毒后用注射器抽取膿血性液體送檢。
標本處理:2小時內(nèi)常溫送檢。將標本直接接種于培養(yǎng)基。較濃稠的標本需使用消化液處理。
標本的采集與處理-下呼吸道標本(深部痰液,支氣管吸取物,肺泡灌洗液)
標本采集:清潔口腔后采集清晨第一口痰液。采用外科方法進行支氣管毛刷取樣和采集肺泡灌洗液。唾液或24小時痰液都不能用來進行真菌培養(yǎng)。
標本處理:2小時內(nèi)室溫送檢;若不能及時送檢,則4℃保存。將標本接種至含抗生素的選擇培養(yǎng)基中。較黏稠的下呼吸道標本需要使用消化液處理,并2000g離心10分鐘后取沉渣接種。
標本的采集與處理-眼(角膜刮片、玻璃體液等)
標本采集:一般由臨床醫(yī)生操作;角膜刮片,針吸玻璃體液
標本處理:15分鐘內(nèi)常溫送檢。若不能及時送檢,則常溫保存。角膜刮片直接接種至不含抑制劑的培養(yǎng)皿中,采用X或C型涂菌方式;玻璃體液離心后取沉淀物接種。
標本的采集與處理-組織標本
采集標本后用無菌容器轉(zhuǎn)運,如標本量較少,應(yīng)滴加幾滴無菌鹽水保濕。
標本處理:及時送檢,或室溫保存。
培養(yǎng)標本使用滅菌眼科剪將標本剪成米粒大小后接種;
懷疑組織胞漿菌感染應(yīng)對組織進行研磨,或使用裂解離心技術(shù)進行處理,以使組織胞漿菌釋放出來;
懷疑接合菌感染的組織則直接接種。
鏡檢組織標本需進行研磨,但這一操作會影響絲狀真菌培養(yǎng)陽性率,組織鏡檢建議病理科與檢驗科聯(lián)合檢測。
組織標本最好接種到包含抗生素和血的培養(yǎng)基中。
標本的采集與處理-尿液
標本采集:采集早晨第一次清潔尿液、恥骨上聯(lián)合穿刺尿液或?qū)Ч苣蛞?050ml;不能采用24小時尿液。
標本處理:2小時內(nèi)常溫送檢;若不能及時送檢,則4℃保存。
尿液接種前需要2000g離心10分鐘,取沉渣進行鏡檢和接種。
尿液真菌培養(yǎng)不推薦定量檢測。
不合格標本
• 標本標識與申請單不符,標識錯誤或沒有標識;
• 標本未按規(guī)定采集于無菌容器或容器選擇不恰當(dāng);
• 采集標本時未按規(guī)定作消毒或清潔創(chuàng)口;
• 標本采集量過少;
• 標本保存方式不恰當(dāng)或保存時間超過規(guī)定;
• 血培養(yǎng)瓶中有凝塊;
• 血培養(yǎng)瓶破碎,損壞,滲漏或過效期;
• 血培養(yǎng)瓶數(shù)不夠;
• 稀薄唾液或低倍鏡下上皮細胞數(shù)大于10個;
• 采集尿液標本未清潔會陰部及尿道口。
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