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不同檢測方法對血小板計(jì)數(shù)的影響觀察
【摘要】 目的 探討電阻抗法血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板假性增高或降低的影響。方法 取檢查血常規(guī)正常標(biāo)本10例，溶血標(biāo)本10例，脂血標(biāo)本10例，小紅細(xì)胞血10例，EDTA?K2依賴性凝集10例，溶血標(biāo)本10例，共50例。采用電阻抗法血細(xì)胞分析儀和目視顯微鏡法對50例血標(biāo)本進(jìn)行血小板的計(jì)數(shù)。結(jié)果 10例正常標(biāo)本電阻抗法血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)和目視顯微鏡計(jì)數(shù)的結(jié)果差異無顯著性(P>0.05)，40例脂血、溶血、小紅細(xì)胞血、EDTA?K2依賴性凝集標(biāo)本電阻抗法血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)和顯微鏡計(jì)數(shù)的結(jié)果差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)論 電阻抗法對脂血、溶血、小紅細(xì)胞血、EDTA?K2依賴性凝集標(biāo)本的測定可導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)假性偏高或降低。
【關(guān)鍵詞】 血細(xì)胞分析儀; 血小板計(jì)數(shù); 顯微鏡計(jì)數(shù)
為了保證臨床作出正確和安全的臨床決策，關(guān)鍵是血小板計(jì)數(shù)不僅要精密，而且更要準(zhǔn)確。因此，選擇一種準(zhǔn)確血小板計(jì)數(shù)方法和采集合格的標(biāo)本，具有重要的臨床意義。本試驗(yàn)通過用儀器和手工2種方法對血小板計(jì)數(shù)進(jìn)行對比，探討其應(yīng)用價值，使之為臨床精確計(jì)數(shù)血小板提供參考。
1 材料與方法
1.1 材料 (1)儀器和試劑：采用日本Sysmex KX?21N電阻抗法血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑和顯微鏡計(jì)數(shù)及嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》配制的草酸銨稀釋液，對50例患者標(biāo)本進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)前已做好質(zhì)控，空白計(jì)數(shù)符合標(biāo)準(zhǔn)。(2)標(biāo)本：選擇來我院檢查血常規(guī)的患者標(biāo)本50例，其中正常標(biāo)本10例，脂血標(biāo)本10例，溶血標(biāo)本10例，小紅細(xì)胞10例，EDTA?K2依賴性凝集10例，血細(xì)胞分析儀采用的標(biāo)本是抽取靜脈血2 ml加入到硅化內(nèi)壁的EDTA?K2抗凝管中混勻。目視顯微鏡計(jì)數(shù)法采用同一血標(biāo)本20 μL(注：EDTA?K2依賴性凝集標(biāo)本應(yīng)重新手工采集標(biāo)本)，加入到盛有0.38 ml的草酸銨稀釋液的清潔塑料試管中混勻，所有血液標(biāo)本均在采集后室溫(18℃～22℃)放置，4 h內(nèi)完成各種方法計(jì)數(shù)血小板。
1.2 方法 采用日本Sysmex KX?21N血細(xì)胞分析儀，對50例標(biāo)本進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，每個樣本計(jì)數(shù)3次，取平均值。采用目視顯微鏡計(jì)數(shù)法對50例標(biāo)本進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，每個樣本計(jì)數(shù)3次，取平均值。
2 結(jié)果
50例標(biāo)本用2種方法計(jì)數(shù)血小板結(jié)果比較，10例正常標(biāo)本2法比較差異無顯著性(P>0.05)，10例脂血標(biāo)本、10例溶血標(biāo)本、小紅細(xì)胞血標(biāo)本10例、DTA?K2依賴性凝集標(biāo)本10例，2法比較差異有顯著性(P<0.05)。血細(xì)胞分析儀采用電阻抗原理計(jì)數(shù)血小板時脂血、溶血、小紅細(xì)胞結(jié)果高于目視顯微鏡法計(jì)數(shù)，表明電阻抗法將紅細(xì)胞碎片，小紅細(xì)胞，和脂血中與血小板大小相似的乳糜微粒等作為了血小板計(jì)數(shù)、導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)偏高。EDTA?K2依賴性凝集標(biāo)本結(jié)果低于目視顯微鏡法計(jì)數(shù)，表明抗凝血在室溫下發(fā)生EDTA依賴性凝集，血細(xì)胞分析儀對凝集的結(jié)構(gòu)不能辯別，而誤以為是白細(xì)胞造成血小板計(jì)數(shù)假性偏低。
3 討論
電阻抗型血細(xì)胞分析儀有較好的重復(fù)性，一般分析30-36f1的顆粒設(shè)置為血小板，但不能排除白細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞、脂類和蛋白的聚集體等和血小板相類似顆粒、血小板聚集的干擾，導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)偏高或下降。目視顯微鏡法操作規(guī)程嚴(yán)格，準(zhǔn)確性高，血小板易于識別，是血細(xì)胞分析儀校正的關(guān)鍵步驟，可避免因紅細(xì)胞碎片、顆粒、小紅細(xì)胞、聚集體等對血小板計(jì)數(shù)的干擾。為了使血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確，如遇上述脂血、溶血、小紅細(xì)胞血、EDTA-K2依賴性凝集標(biāo)本應(yīng)用目視顯微鏡計(jì)數(shù)法作校正。在日常工作中經(jīng)常遇到血小板較低或較高的情況，特別是50×109/L時，不僅要及時手工計(jì)數(shù)，還應(yīng)該涂片觀察細(xì)胞形態(tài)變化，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
另外，采血的過程及血液和抗凝劑的比例都很重要，采血速度慢，多次穿刺和血液比例過高，都可能引起血小板凝集，阻塞儀器而無法測得真實(shí)的結(jié)果。上述問題應(yīng)該引起我們的注意，加強(qiáng)責(zé)任心。針對不同問題及時進(jìn)行手工復(fù)檢計(jì)數(shù)是非常重要的。
【參考文獻(xiàn)】
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